庆阳杖绕金融服务有限公司

鼎國自產 動物組織 / 細胞 / 血液基因組 DNA 提取試劑盒 ；350元 

純化效果檢測

取2-5μl得到的DNA產物，0.7%agarose電泳檢測DNA分子的完整性和紫外分光光度計檢測濃度和純度。
DNA在260nm處有吸收峰，檢測時應該使OD₂₆₀值在0.1到1.0之間數值較準確。
OD₂₆₀為1時大概相當于50μg/ml雙鏈DNA，40μg/ml單鏈DNA。
核酸濃度（μg/ml）=OD₂₆₀×50×稀釋倍數。
OD₂₆₀/OD₂₈₀的值應該為1.7~2.0。
常見問題分析：

產品簡介：
本試劑盒采用自主研發的*裂解液和酶相結合的方法裂解材料，具有效率高、性能穩定、
重復性高、速度快等特點。材料被裂解并、經蛋白酶K消化后，DNA在高鹽低pH的條件下，
與硅基質膜特異性結合，在低鹽高pH值條件下，吸附的DNA被洗脫下來。
本試劑盒適用于各種動物組織、動物細胞和血液基因組DNA的提取。
提取的基因組DNA可以直接用作PCR模板、酶切、雜交等分子生物學實驗。
組成：
 

可選試劑

 實驗前試劑準備

 Wash buffer A中加入18 ml 無水乙醇，充分混勻。
 Wash buffer B中加入64 ml無水乙醇，充分混勻。
 儲存條件：  請按照上表中注意事項的條件保存，其他未說明的可常溫或4度保存。
 步驟：
 1、樣品處理
 全血：取50-300 μl全血，加入3倍體積的紅細胞裂解液，震蕩混勻，12000rpm離心1min，
 去上清。加入600 μl Lysis Buffer A，震蕩混勻。
 禽血：加入10-100 μl禽血，直接加入600 μl Lysis Buffer A，顛倒混勻。
 動物組織：取20-50mg動物組織，液氮研磨或勻漿，加入100 μl PBS重懸樣品，
 然后加入到準備好的600 μl Lysis Buffer A，振蕩混勻。
 動物細胞：離心收集10⁵-10⁶個培養細胞，加入100 μl PBS重懸細胞，
 加入600 μl Lysis Buffer A，震蕩混勻。
 2、 加入10 μl Proteinase K，60 ℃水浴20 min～40 min，其間顛倒混勻數次。
 如需消化RNA,可待樣品裂解*后加入10 μl RNase A，混勻，室溫放置10 min。
  若加入樣品較多，可適當延長水浴時間，適量增加Proteinase K的量，按比例增加
  Lysis Buffer A和Lysis Buffer B量。
 3、 加入400 μl Lysis Buffer B，漩渦震蕩30 s。
 4、 12,000 rpm離心5 min，將上清轉入離心柱中，靜置2 min。

上清可能出現少量白色漂浮物，此為未消化*的細胞和蛋白質。

 5、 12,000 rpm離心1 min，棄廢液。
 6、 加入700 μl Wash buffer A（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇），12,000 rpm離心  1min，棄廢液。
 7、 加入700 μl Wash buffer B（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇）， 12,000 rpm離  心  1min，棄廢液。
 8、 加入500 μl Wash buffer B，12,000 rpm離心1 min，棄廢液。
 9、 再次12,000 rpm離心2 min，將離心柱置于新的離心管中，并打開離心柱蓋，于室溫或37 ℃恒  溫箱放置5~10min，
 直至無明顯乙醇味。
 10、在硅基質膜中央加入50～200 μl Elution Buffer或雙蒸水(事先預熱55～65 ℃)，置于室  溫2  min，12,000 rpm離2 min。
 所得液體即為基因組DNA溶液。